斑马鱼神经干细胞研究进展
2008-03-18 / 编辑
清华大学生物科学与技术系孟安明教授的课题组对特定基因在斑马鱼神经干细胞中的功能进行了深入研究，发现sp8基因和sp8-like基因有抑制初级神经元形成的作用，而且两个基因能够协同工作。
Sp8属于锌指转录因子家族成员，它特异性的表达在中枢神经系统和肢芽。有文献报道斑马鱼的Sp8对于次级神经元中gata-2的不表达是必需的，暗示了sp8可能参与了次级神经元的分化。
研究中，课题组通过显微注射sp8和sp8-like的morpholino和RNA，选择初级神经元的标记基因进行原位杂交，并发现降低体内sp8和sp8-like表达水平导致标记基因表达升高――这意味着初级神经元形成增多，而过量表达外源相应基因的胚胎结果相反，则说明sp8和sp8-like基因在体内有抑制初级神经元形成的作用，而且这两个基因的功能是协同的。
为了进一步证明上述结果，研究组选择了转基因斑马鱼TG::huC(S)-GFP(M4-GM2)作为研究模型,其中GFP特异表达在背侧的初级RB神经元中。他们发现抑制sp8和sp8-like基因表达能够协同促进初级RB神经元的形成。
在这些结果基础上，研究人员推测sp8和sp8-like基因在体内的作用可能是抑制神经干细胞分化为初级神经元，维持其增殖的特性，并在特定的时期促进其分化为次级神经元。
为了证明以上假设，他们利用转基因鱼TG::GATA2-GFP（其中GFP特异的表达在次级神经元中）发现减少体内的sp8和sp8-like基因的表达能够协同的减少次级神经元的形成。利用次级运动神经元特异性的抗体，通过免疫组化实验，研究人员重复了上述结果。
为了证明sp8和sp8-like基因在体内能够维持神经干细胞的增殖，研究组通过BrdU的免疫组化，发现注射morpholino的胚胎神经管中增殖的细胞数减少，进一步证明了上述假设。
Sp8属于锌指转录因子家族成员，它特异性的表达在中枢神经系统和肢芽。有文献报道斑马鱼的Sp8对于次级神经元中gata-2的不表达是必需的，暗示了sp8可能参与了次级神经元的分化。
研究中，课题组通过显微注射sp8和sp8-like的morpholino和RNA，选择初级神经元的标记基因进行原位杂交，并发现降低体内sp8和sp8-like表达水平导致标记基因表达升高――这意味着初级神经元形成增多，而过量表达外源相应基因的胚胎结果相反，则说明sp8和sp8-like基因在体内有抑制初级神经元形成的作用，而且这两个基因的功能是协同的。
为了进一步证明上述结果，研究组选择了转基因斑马鱼TG::huC(S)-GFP(M4-GM2)作为研究模型,其中GFP特异表达在背侧的初级RB神经元中。他们发现抑制sp8和sp8-like基因表达能够协同促进初级RB神经元的形成。
在这些结果基础上，研究人员推测sp8和sp8-like基因在体内的作用可能是抑制神经干细胞分化为初级神经元，维持其增殖的特性，并在特定的时期促进其分化为次级神经元。
为了证明以上假设，他们利用转基因鱼TG::GATA2-GFP（其中GFP特异的表达在次级神经元中）发现减少体内的sp8和sp8-like基因的表达能够协同的减少次级神经元的形成。利用次级运动神经元特异性的抗体，通过免疫组化实验，研究人员重复了上述结果。
为了证明sp8和sp8-like基因在体内能够维持神经干细胞的增殖，研究组通过BrdU的免疫组化，发现注射morpholino的胚胎神经管中增殖的细胞数减少，进一步证明了上述假设。
