利用斑马鱼评价样品的促进骨骼发育活性
2022-05-16 / 李宁编辑
硬骨动物和哺乳动物在骨骼元素、骨化机制和骨基质成分方面有许多共同的遗传特征。斑马鱼作为一种硬骨鱼，其骨骼发育过程中的基因、信号通路与人类高度同源，且与其他的动物模型相比，斑马鱼具有个体小适合高通量筛选、幼鱼身体透明易于观察骨骼发育的特点。在基础和临床前研究中，斑马鱼已成为研究骨骼发育和相关疾病的重要模式生物。
评价原理
斑马鱼的椎骨数量和生理曲度与人类相似，脊椎软骨在2~3 dpf时围绕脊索周围开始发育，并逐渐向神经管和血管方向延伸，在6 dpf时，腹前体节已基本分化成软骨细胞，应用特异性与钙结合的荧光染料染色，可观察骨骼面积及骨密度情况。因此，基于斑马鱼骨骼发育规律，可用于评价样品促进骨骼发育情况。此外，斑马鱼具有与人类基因高度同源的促进成骨细胞特异性相关基因（alp、sp7、rnx2a、oc），因此通过实时荧光定量PCR技术（RT-qPCR）可对上述四个基因的表达进行定量检测。
斑马鱼的椎骨数量和生理曲度与人类相似，脊椎软骨在2~3 dpf时围绕脊索周围开始发育，并逐渐向神经管和血管方向延伸，在6 dpf时，腹前体节已基本分化成软骨细胞，应用特异性与钙结合的荧光染料染色，可观察骨骼面积及骨密度情况。因此，基于斑马鱼骨骼发育规律，可用于评价样品促进骨骼发育情况。此外，斑马鱼具有与人类基因高度同源的促进成骨细胞特异性相关基因（alp、sp7、rnx2a、oc），因此通过实时荧光定量PCR技术（RT-qPCR）可对上述四个基因的表达进行定量检测。
评价指标
斑马鱼骨骼荧光染色面积
斑马鱼骨骼荧光染色强度
alp、sp7、rnx2a和oc基因的表达量
斑马鱼骨骼荧光染色面积
斑马鱼骨骼荧光染色强度
alp、sp7、rnx2a和oc基因的表达量
结果展示
